Hur Fixar Man PCR-fel 7500 I Realtid

Hur Fixar Man PCR-fel 7500 I Realtid

Går din dator långsamt, kraschar ofta eller fungerar den bara inte lika bra? Då behöver du Reimage!

Dagens guide är utformad för att hjälpa dig när du öppnar PCR 7500-felsökningsfelet i realtid.

7500 true time pcr-felsökning

Kapitel 20. Generera data från RQ-diskar – Rapid System 7500

Felsökning

Applied Biosystems 7300/7500/7500 Snabbkvantifiering i realtid PCR-systemguide

Använd tio till 100 mg cDNA-struktur per 20 µl svar på blandningen.

För bästa resultat bör du starta interaktionsadvokatfältet så snart som möjligt

Du kan möta den och köra den med hjälp av 7500 Fast alltid på

För bästa slutsatser, fördela reaktionsblandningen på vanligtvis plattan så länge som möjligt

Du kan ladda ner och köra den med dess 7500 Fast-verktyg.

Se till att arctic Cycler-läget är inställt på Snabb (se

Välj ROX-färgämnet eftersom undersökningen är passiv när den justeras

En enda lösning för alla dina Windows-relaterade problem

Får du Blue Screen of Death? Restoro kommer att fixa alla dessa problem och mer. En programvara som låter dig fixa ett stort antal Windows-relaterade problem och problem. Det kan enkelt och snabbt känna igen alla Windows-fel (inklusive den fruktade Blue Screen of Death), och vidta lämpliga åtgärder för att lösa dessa problem. Applikationen kommer också att upptäcka filer och program som kraschar ofta, vilket gör att du kan åtgärda deras problem med ett enda klick.

  • 1. Ladda ner och installera Reimage
  • 2. Starta programmet och klicka på "Sök efter problem"
  • 3. Klicka på knappen "Åtgärda alla problem" för att starta reparationsprocessen

  • Välj ROX som passiv referens under installationen

    Utveckla ett utmärkt protokoll för att återställa från PCR- eller RT-PCR-fel

    Möjliga källor till fel och/eller problem Operatörsfel

    Det finns många möjligheter till professionellt misslyckande. I Källorna till felen är ofta inte identifierade. Det första du bör tänka på när du felsöker någon procedur är att granska hur protokollet och upprepa de exakta såväl som kasten. Det är viktigt att bekanta sig för hand med protokollet (se Bilaga A, Protokoll till denna situationsguide) och sedan kontakta en erfaren molekylärbiolog som kan validera experimentet. Den varnande mobilen för en postdoktor som körde ett par hopspända PCR-tester innan de insåg att många av dNTP:erna saknades utanför expert-PCR-mixen är utan tvekan en påminnelse om att även de bästa överstressade forskarna ofta är försvarslösa mot att inte mycket svåra misstag.

    Huvudmix

    Fel eller hälsoproblem när man använder mastermixen på känsliga komponenter kan bidra till och även av katastrofala boost-fel i alla val och aggressiva kontroller. Innan du upprepar en persons experiment, kontrollera alla komponenter och denna speciella koncentration. Om bara en ny beställning av reagenser används, är informationsteknologi användbar för att jämföra det samtida med det gamla innan man startar en fantastisk serie experiment.

    Det är viktigt att tänka på när du byter mellan Wizard Mix-produkter att vissa säkra sidorna är associerade med hjälp av pterostilbene. känslig för kombinationer av buffert/annealingstemperatur (Ta) av primersammansättning/mängd. Att ändra en relaterad till dessa resultat kan leda till andras förmågor. Dubbelkolla därför alla doser inom bara de överblandade mastermixarna och högt på alla specifika instrument innan du gör betydande ändringar. Det är också viktigt att noggrant läser de grundläggande instruktionerna som ofta följer med varje mastermix eftersom de beskriver de rekommenderade sjukdomarna mycket bättre för enzymet, bufferten för heta startmekanismer och komponenterna när det kommer till frågan.

    Det är god vetenskaplig laboratoriepraxis att förbereda en masterpreparat som är tillräckligt inflytelserik så att alla prover delas. Se till att alla komponenter effektivt kan tinas och blandas väl, så att huvudblandningen för försöket verkligen är mycket väl blandad nyligen, den delades in i proverna. Detta gäller särskilt för all detektering av vissa 2x-buffertar, som KiCqStart®, som är tuffare än vanliga PCR-buffertar.

    oligooptimering

    Oligo kan orsaka problem när som helst människor; B. Felaktig eller felaktigt utformad progression, körs på suboptimala nivåer, suboptimal Ta, felmärkt eller blank (för prober). En analys utförd under suboptimala förhållanden för din oligo, eller med dåliga preferenser och design, kan ge data, trots att det kanske inte återspeglar det exakta biologiområdet som övervägs. När man skaffar en produkt som är förorenad när man använder frystorkade oligonukleotider, krävs följande:

    1. Kontrollera beställning
    2. Gör konstruktivt att allt DNA resuspenderas tidigare än användning.
    3. Bekräfta att lösningen har en specifik förväntad koncentration

    Resuspendera oligonukleotiderna genom att värma upp oligonukleotiderna till 90°C i några minuter och sedan blanda väl. Upprepade frys-upptiningscykler kan också påverka typen av prestanda hos oligonukleotider, och dessutom bör alla oligonukleotider på produktnivåer (vanligtvis 100 µM) alikvoteras för att inte tala om lagrade vid -20°C eller -80°C under lång tid . p>

    Det är ofta mycket viktigt under den angivna felsökningsperioden att verifiera att den faktiska serien beställdes genom att framgångsrikt återgå till målsekvensen och bekräfta detta, även oligosekvenser är faktiskt de senaste. Se till att oligon var något bra genom att kontakta oligo-återförsäljarna. Mät arbetskoncentrationen av dina huvudsakliga nuvarande oligomerer och visuella fluorescerande kemiska ämnen för att säkerställa att de är klassificerade. Testa probanalysprimrar i SYBR® Grön I kvant PCR-blandning för att kontrollera amplifiering. Överväg att finjustera primerfokus eller Ta (se Assay Optimization Validation) och. När du använder en mångsidig sond för första gången, lagra fluorescensdata för så många våglängder som möjligt så att nästan vilken styrka som helst av signalen mellan huvudströmmen kan observeras och kända fel kan detekteras.

    Otillräcklig PCR-optimering

    Effekten av testoptimeringen beskrivs demonstreras i testoptimeringen såväl som verifieringen. Om analysen kanske inte fungerar eller fungerar suboptimalt, men för dig är inga fel i formatet eller operationsprocedurerna för den distinktionen, kan den avvika från sökvillkoren för de experimentella förhållandena. Vid felsökning, testa primers vid ett slutligt mål på 100 nM, 500 nM och sedan 900 nM och/eller Ta mellan 3 sekunder vid 55°C till 70°C (genom att göra denna temperaturgradient ). för att se som om testversionen kommer att förbättras med mycket optimering.

    RT-PCR- och QPCR-testdesign

    Analysedesign beskrivs på PCR/qPCR/qPCR Assay Design. När du felsöker ett definitivt test, se till att designen verkligen är validerad. Bekräfta att den federala PCR/qPCR-regeringen som är associerad med positionen för det specifika amplikonet matchar primern i flera andra RT-protokoll. Notera till exempel att analyser tillämpade på cDNA, om de upplevs efter oligo dT-priming, bör du vara närmare 3′-änden som är kopplad till transkriptet. Se till att beställningskonceptet är bra och att dess lämpliga anslutningsalternativ och SNP utan tvekan övervägs.

    7500 real day pcr felsökning

    Skaffa Reimage och fixa din dator på under 5 minuter. Ladda ner nu.

    Swedish